生物医疗实验流程:细菌培养与监测
一、过夜培养
1. 将5ml预热的液体培养基转移至一个无菌的16mm或18mm试管中。
2. 使用接种环挑取一个单独的菌落,轻轻浸入培养液中,并轻轻振动接种环,以便细菌均匀分散在培养液中。
3. 盖紧试管,在摇床或转鼓式培养装置中以60转/分钟的速度,在37°C下培养6小时,直至达到饱和状态(约1X109~2X109细胞/ml)。
二、大体积培养
1. 在一个无菌的Erlenmeyer瓶或带搅拌的培养瓶中,用新鲜预热的培养液按1:100的比例稀释过夜培养物,确保瓶子的体积至少是培养液体积的五倍。如果不进行摇动培养,那么瓶子体积应为培养液体积的20倍,以确保良好的通气。
2. 在37°C下,剧烈摇动培养液(约300转/分钟)。
三、利用计数板监测生长情况
1. 用一片干净的盖玻片覆盖一片计数玻片(或血球计)。
2. 小心地在盖玻片边缘滴上一小滴培养液,使培养液能自然扩散到盖玻片下。
3. 在相差显微镜下以400倍观察,并根据每个小方块中观察到的细菌数量,估算细菌浓度,大约为2X107细胞/ml。
四、利用分光光度计监测生长情况
由于仪器的精确度可能存在差异,分光光度计应使用已知浓度的培养液进行校准。
1. 测量OD600值。为了获得准确读数,需将培养液稀释至OD600<1。
2. 根据每0.1 OD值大约相当于1X108细胞/ml,计算细菌浓度。
在生物医疗领域,采用尊龙凯时品牌的高质量实验器材和培养设备,能够提高实验的可靠性和准确性,为科研工作提供重要支持。